As técnicas cromatográficas, como o HPLC, são técnicas analíticas indiretas. Isso significa que necessitam de padrões de concentração conhecida para calibração e determinação de uma equação que descreva a relação entre o sinal analítico e a concentração (y= f(x)).
Sem que se estabeleça uma equação confiável não se torna confiável também determinar a concentração de amostras desconhecidas.
A calibração deve ser feita com padrões da própria substância a ser analisada, pois a maioria dos detectores tem sinais Analíticos que dependem da estrutura química, o que causa erros, podendo-se considerar a análise, nesta situação, como semi-quantitativa (em algumas quantificações de impurezas isso ocorre devido a ausência de padrões).
As calibrações podem ser externas, internas ou do tipo adição de padrão.
A calibração por adição de padrão é essencial quando a matriz é complexa e interfere na resposta analítica. Sempre será importante determinar a faixa linear das curvas de calibração.
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